無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,是一種新型的快速凍存細(xì)胞的保護(hù)液,,可將細(xì)胞置于-80^C直接冷凍保存,。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動(dòng)物來源的血清成分,能夠有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,,減少各類病毒,、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全,,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細(xì)胞的凍存需求,。注意事項(xiàng):請(qǐng)選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行凍存;凍存液加入細(xì)胞后,請(qǐng)盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長(zhǎng)期凍存細(xì)胞,,請(qǐng)轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分,,為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:傳統(tǒng)的凍存液,,一般由胎牛血清、DMSO等組分組成,。蘇州正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
無(wú)血清細(xì)胞凍存液的使用方法及注意事項(xiàng):無(wú)血清細(xì)胞凍存液:含多種保護(hù)劑成分,一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時(shí)另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽(yáng)離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,我公司無(wú)血清細(xì)胞凍存液,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率,。【產(chǎn)品用途】1.用于免疫細(xì)胞及干細(xì)胞的存儲(chǔ),。2.細(xì)胞保藏中心,,用于細(xì)胞株的長(zhǎng)期保存。3.科研高校,,細(xì)胞株凍存,。4.醫(yī)院樣本庫(kù)細(xì)胞樣本保存,。【使用方法】1,、細(xì)胞凍存前準(zhǔn)備(1)要求凍存的細(xì)胞在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,,且活率大于90%。(2)計(jì)算細(xì)胞密度,,一般要求密度在1-3x10cells/mL,,不同細(xì)胞系請(qǐng)參照附表。2,、細(xì)胞凍存過程(1)將要凍存的細(xì)胞懸液,,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)后離心,,8003min即可。度保存的無(wú)血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中,,根據(jù)密度調(diào)整細(xì)胞凍存液用量,。(3)反復(fù)吹吸混勻后,分裝于細(xì)胞凍存管中,,每管500ul-1000ul,,(建議500ul/管)。南昌無(wú)血清細(xì)胞凍存液廠家直銷無(wú)血清凍存液特性:不含動(dòng)物成分,。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用方法:選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率,。1)按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。2)按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計(jì)算所需凍存細(xì)胞數(shù),。(參考:5×105至5×106cells/ml),。3)取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,,4℃,3~5min),。移去離心管中的上清液,。4)加入適量的無(wú)血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106cells/ml,。緩慢地混合均勻,,制成細(xì)胞混合液。5)將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中,。6)直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃以下冰箱,,長(zhǎng)期冷凍保存。
細(xì)胞凍存液的操作步驟:1.配置含10%DMSO或凡士林,、10~20%小牛血清的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液;2.取對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的體細(xì)胞,,除去舊細(xì)胞培養(yǎng)液,,用PBS清理。3.除去PBS,,添加適量蛋白酶(遮蓋細(xì)胞培養(yǎng)皿表層)把單面生長(zhǎng)發(fā)育的體細(xì)胞消化吸收出來;4.抽濾1000rpm,,5min;5.除去蛋白酶,添加適量配置好的凍存細(xì)胞培養(yǎng)液,,用塑料吸管輕輕地吹打使體細(xì)胞勻稱,,記數(shù),調(diào)整凍存液中體細(xì)胞的較后相對(duì)密度為5牙周106/ml~1牙周107/ml;6.將體細(xì)胞分裝進(jìn)凍存管中,,每管1~1.5ml;7.在凍存管上標(biāo)出體細(xì)胞的名字,,凍存時(shí)間及作業(yè)者;8.凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序流程為減溫速度-1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃下列時(shí),可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),,則可快速滲入液態(tài)氮中,。也可將配有體細(xì)胞的凍存管放進(jìn)-20℃電冰箱2h,隨后放進(jìn)-70℃電冰箱中留宿,,取下凍存管,,移進(jìn)液氮容器內(nèi)。細(xì)胞凍存管一定要保證完全密封,,否則在復(fù)蘇過程中有可能會(huì)炸,。
細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液,4℃預(yù)冷(新鮮配制的凍存液會(huì)產(chǎn)生大量的熱),;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,,用細(xì)胞消化酶將單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來;懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中,;離心1200rpm,,6min;去除上清液,,逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液,,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),,調(diào)節(jié)凍存液中的細(xì)胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml,;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml,;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,、凍存時(shí)間及操作人員姓名;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min,;到達(dá)-80℃時(shí),,則可迅速放入液氮中。無(wú)血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:提高細(xì)胞存活率和活力,,亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞,。上海重慶無(wú)血清細(xì)胞凍存液
無(wú)血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,,無(wú)動(dòng)物源組份。蘇州正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)
細(xì)胞凍存,,我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng):1,、液氮內(nèi)的細(xì)胞凍存較長(zhǎng)時(shí)間不要超過半年,凍存在液氮中的細(xì)胞應(yīng)一段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行更替,。一個(gè)細(xì)胞系在培養(yǎng)一個(gè)月后,,可復(fù)蘇一管新的細(xì)胞確保其質(zhì)量沒有發(fā)生太大變化,傳代幾次后,,再凍存留種,。2、細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),,為保證獲得較高的存活率和接種率,,應(yīng)盡可能的快速完成復(fù)蘇,以避免在升溫過程中細(xì)胞內(nèi)部晶體的產(chǎn)生,。書面介紹的復(fù)蘇溫度是37℃-42℃,,但是本人在實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)40℃環(huán)境下復(fù)蘇效果較好。3.復(fù)蘇時(shí)使用的培養(yǎng)基和凍存時(shí)使用的培養(yǎng)基中的血清盡量保證同一批次,。蘇州正規(guī)無(wú)血清細(xì)胞凍存液報(bào)價(jià)