收藏查看我的收藏0有用+1已投票0細胞培養(yǎng)編輯鎖定本詞條由“科普中國”科學百科詞條編寫與應用工作項目審核,。細胞培養(yǎng)(cellculture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度,、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),,使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法,。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術(shù),,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù),,還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,,細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)??寺?。細胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術(shù)必不可少的環(huán)節(jié),,而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。細胞培養(yǎng)技術(shù)是細胞生物學研究方法中重要和常用技術(shù),,通過細胞培養(yǎng)既可以獲得大量細胞,,又可以借此研究細胞的信號轉(zhuǎn)導、細胞的合成代謝,、細胞的生長增殖等,。[1]中文名細胞培養(yǎng)外文名cellculture別名細胞克隆術(shù)語細胞培養(yǎng)技術(shù)地位生物技術(shù)中基礎的技術(shù)常用培養(yǎng)基無鈣、鎂,、離子溶液目錄1分類2環(huán)境及條件?環(huán)境因素?營養(yǎng)條件3設施器材4一般過程5具體步驟6注意事項細胞培養(yǎng)分類編輯動物細胞培養(yǎng)高速冷凍離心機在所有的細胞離體培養(yǎng)中,,困難的是動物細胞培養(yǎng)。SD大鼠主動脈血管平滑肌細胞,,Rat Aortic vascular smooth muscle cells 貨號:PC-R-18302,。上海豚鼠原代細胞分離
如果接種的細胞密度過低,細胞之間的促生長作用很小,,也很難使細胞適應從體內(nèi)的組織環(huán)境到被分散后進入生存環(huán)境的變化過程,。如果接種的細胞密度過大,會導致營養(yǎng)物質(zhì)供應不足,,代謝廢物積累較快需要經(jīng)常換液和傳代,。2)適當增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度,給培養(yǎng)的細胞提供更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用,,會極大提高原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率,。待細胞適應體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。3)盡快使接種的細胞貼壁,,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵,。可以在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3h到5h,,待細胞貼壁后,,再補足培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。3、懸浮型原代細胞1)必須保持細胞的懸浮狀態(tài),??梢酝ㄟ^增加培養(yǎng)液的黏度來幫助細胞呈懸浮狀態(tài),如給培養(yǎng)液中加入低濃度的透明質(zhì)酸復合物,。在有攪拌裝置的培養(yǎng)器皿內(nèi)加入培養(yǎng)液是,,以5ml為限度,否則攪拌時會產(chǎn)生氣泡對細胞造成傷害,。使用這種方式需注意勿使攪拌速度過快,,否則即可使培養(yǎng)液溢出又容易造成污染。如果培養(yǎng)液的量在5ml以下,,可以采用旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng),。給懸浮培養(yǎng)的細胞換液時要注意不要吸出細胞。2)能夠進行懸浮培養(yǎng)的細胞,,其生命力一般都比較旺盛,,體外分裂增殖的速度較快,營養(yǎng)成分消耗大,。黑龍江外包原代細胞服務在進行血管內(nèi)皮細胞實驗時,,通常選用的細胞模型為人臍靜脈內(nèi)皮細胞。
視實驗目的而定),,經(jīng)過一定的處理(如消化分散細胞,、分離等)后接入培養(yǎng)器皿中,這一過程稱為取材,。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程,。機體取出的組織細胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),,實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養(yǎng),,分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),組織比正常組織容易培養(yǎng),。取材后應立即處理,,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培養(yǎng)時,,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,,置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時應嚴格保持無菌,,同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì),。取病理組織和皮膚及消化道上皮細胞時容易帶菌,為減少污染可用素處理,。由組織并分離分散細胞的方法可參閱有關文獻,。三,、培養(yǎng)將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),,則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基,。如系細胞培養(yǎng),,一般應在接入培養(yǎng)器皿之前進行細胞計數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基,。細胞進入培養(yǎng)器皿后,,立即放入培養(yǎng)箱中,使細胞盡早進入生長狀態(tài),。正在培養(yǎng)中的細胞應每隔一定時間觀察一次,。
作為本實用新型所述的一種可以分離的細胞培養(yǎng)板的一方案,其中:所述底座底部固定安裝有支撐腳架,。與現(xiàn)有技術(shù)相比,,本實用新型的有益效果是:通過該一種可以分離的細胞培養(yǎng)板的設置,結(jié)構(gòu)設計合理,,通過底座、一號培養(yǎng)板,、梯形卡槽,、二號培養(yǎng)板、梯形卡塊和固定螺絲的配合,,實現(xiàn)了方便拆卸,,且連接更加穩(wěn)定,通過橫向標尺和縱向標尺的配合,,方便標號對比,,提高了效率。附圖說明為了更清楚地說明本實用新型實施方式的技術(shù)方案,,下面將結(jié)合附圖和詳細實施方式對本實用新型進行詳細說明,,顯而易見地,下面描述中的附圖是本實用新型的一些實施方式,,對于本領域普通技術(shù)人員來講,,在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其它的附圖,。其中:圖1為本實用新型結(jié)構(gòu)示意圖,;圖2為本實用新型側(cè)視結(jié)構(gòu)示意圖;圖3為本實用新型培養(yǎng)皿槽結(jié)構(gòu)示意圖,。圖中,;100底座,、110支撐腳架、200一號培養(yǎng)板,、210梯形凹槽,、220固定螺絲、300二哈培養(yǎng)板,、310梯形卡塊,、400培養(yǎng)皿槽、410限位槽,、420限位彈簧,、430固定桿、500縱向標尺,、510橫向標尺,。具體實施方式為使本實用新型的上述目的、特征和優(yōu)點能夠更加明顯易懂,,下面結(jié)合附圖對本實用新型的具體實施方式做詳細的說明,。請與我方溝通該組織的取材部分、要求,、儲存及運輸條件,,以方便原代細胞取材,保證實驗的順利進行,。
尤其是上皮組織分散效果好,。與細胞上的鈣、鎂離子結(jié)合形成螯合物后,,形成的機械力可使細胞分散,。Q:細胞量太少,長不起來怎么辦,?A:有幾種辦法,,如對沒消化完的組織塊反復消化,盡量多收集一些細胞,;并且盡量傳代到小皿里,,如6孔板都可以。若是細胞仍太少,,應耐心等待,,盡量不要傳代,只換液,。Q:細胞難以貼壁,?A:盡快使接種的細胞貼壁,是決定培養(yǎng)能否成功的關鍵,。為了盡快促進細胞貼壁,,可以提前1h將千分之的明膠鋪于培養(yǎng)板,。Q:原代細胞培養(yǎng)方法與細胞系不同之處在哪里?A:培養(yǎng)基一般選用RPM1640,,DMEM等,,建議能加入促生長的物質(zhì):如胰島素、氫化可的松,、EGF等因子,。二、原代正常組織分離皮膚是人體,,但長久以來,,表皮細胞一種被認為是難以培養(yǎng)的細胞,限制了皮膚生物學基礎研究的發(fā)展,。作為表皮的主要細胞,,角質(zhì)形成細胞已經(jīng)成為我們了解皮膚生物學至關重要的許多原創(chuàng)性研究的焦點。下面就介紹下小鼠角質(zhì)形成細胞的分離和培養(yǎng),?;具^程如下圖:原代小鼠角質(zhì)細胞的分離步驟實驗結(jié)果:分離出的小鼠角質(zhì)細胞常見問題解答:Q:皮膚組織作為正常組織,與組織分離主要區(qū)別在哪里,?A:首先,,皮膚組織需要用中性分離酶dispaseII將表皮分離出來;其次,,在消化時,。產(chǎn)品名稱:人臍間充質(zhì)干細胞,Human Umbilical cord mesenchymal stem Cells 貨號:PC-H-18105,。上海豚鼠原代細胞分離
人臍動脈內(nèi)皮細胞,Human Umbilical Artery Endothelial Cells,。上海豚鼠原代細胞分離
在下面的描述中闡述了很多具體細節(jié)以便于充分理解本實用新型,,但是本實用新型還可以采用其他不同于在此描述的其它方式來實施,本領域技術(shù)人員可以在不違背本實用新型內(nèi)涵的情況下做類似推廣,,因此本實用新型不受下面公開的具體實施方式的限制,。其次,本實用新型結(jié)合示意圖進行詳細描述,,在詳述本實用新型實施方式時,,為便于說明,表示器件結(jié)構(gòu)的剖面圖會不依一般比例作局部放大,,而且所述示意圖只是示例,,其在此不應限制本實用新型保護的范圍。此外,,在實際制作中應包含長度,、寬度及深度的三維空間尺寸,。為使本實用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚,,下面將結(jié)合附圖對本實用新型的實施方式作進一步地詳細描述,。本實用新型提供如下技術(shù)方案:一種可以分離的細胞培養(yǎng)板,在使用的過程,,拆卸簡單且連接更加溫度,,且方便標號對比,請參閱圖1,,包括底座100,、一號培養(yǎng)板200、二號培養(yǎng)板300,、培養(yǎng)皿槽400和縱向標尺500,;請再次參閱圖1,底座100底部固定安裝有支撐腳架110,,具體的,,支撐腳架110焊接在底座100的底部,底座100用于承載一號培養(yǎng)板200和二號培養(yǎng)板300,,支撐腳架110用于支撐底座100,;請再次參閱圖1,底座100頂部固定安裝有一號培養(yǎng)板200,。上海豚鼠原代細胞分離