原代肝細胞也廣泛應(yīng)用于嵌合體肝模型當(dāng)中。通過將正常人原代肝細胞移植到患有嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中,，可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達能夠促使鼠肝細胞死亡,，從而為人原代肝細胞的移植,、重建和增殖提供了一個適宜的微環(huán)境。在這種重建的嵌合體肝內(nèi),，人肝細胞占據(jù)了大約75％的比例,，并且能夠持續(xù)高水平地表達人血清蛋白。通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠,，研究人員發(fā)現(xiàn)在肝內(nèi)可以檢測到病毒的RNA,。然而，病理觀察并未發(fā)現(xiàn)病毒影響所導(dǎo)致的細胞病變,。這一發(fā)現(xiàn)為研究病毒影響的機制提供了新的途徑,，并為開發(fā)解決病毒影響的新方法提供了新的思路。此外,，這項研究還為研究肝細胞移植和重建提供了新的實驗?zāi)Ｐ?。通過將人原代肝細胞移植到轉(zhuǎn)基因小鼠中，研究人員可以更好地研究原代肝細胞的生長,、分化和功能,，從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項研究的結(jié)果具有重要的臨床意義,，有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略,。原代肝細胞不能傳代和長期培養(yǎng)，會丟失肝細胞分化特性與功能,，通過誘導(dǎo)去分化做成肝祖細胞可以傳代培養(yǎng),。廣東新西蘭兔原代肝細胞種類
原代肝細胞的細胞形態(tài)有許多獨特的形態(tài)特征。原代肝細胞是指從新鮮肝臟組織中分離出來的一種細胞類型,，呈多邊形或多角形形狀,，大小約為20-30微米。原代肝細胞具有明顯的細胞核和細胞質(zhì),，核小而高亮,，細胞核呈圓形或橢圓形，也有雙核情況存在,。原代肝細胞的細胞質(zhì)內(nèi)含有豐富的細胞器和細胞骨架,，濃稠且顏色較深。此外,，原代肝細胞表面具有許多微絨毛和微細突起,，這些結(jié)構(gòu)有助于細胞之間的黏附和交流,。同時，原代肝細胞具有高度的代謝活性和生物合成能力,，能夠合成和分泌多種生物活性物質(zhì),，如蛋白質(zhì)、hormone,、細胞因子等,。這些獨特的形態(tài)特征使得原代肝細胞成為研究肝臟生理和病理過程的重要模型細胞。佛山人體原代肝細胞實驗人原代肝細胞保留了細胞在體內(nèi)環(huán)境里的功能與特性,，是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型,。
原代肝細胞是藥物代謝研究的重要組成。原代肝細胞（Primaryhepatocytes）是指從動物肝臟直接分離的肝實質(zhì)細胞,，具有不可替代的優(yōu)勢,。原代肝細胞與體內(nèi)環(huán)境保持一致，酶量與輔助因子水平濃度與正常生理濃度貼合,，滿足在接近生理狀態(tài)情況下研究藥物代謝和毒性的需求,，真實反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。同時,，利用原代肝細胞在體外進行研究,，無須擔(dān)心動物實驗的倫理問題，也減少了動物實驗所需的成本開支,。目前,，原代肝細胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究，包括探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動力學(xué)的研究,；預(yù)測并解釋藥物—藥物間的相互作用,；研究藥物的細胞毒性等。
肝細胞是人體內(nèi)重要的細胞之一,，扮演著重要的代謝作用,。然而，由于肝細胞的特殊性質(zhì),，使得它們在體外的培養(yǎng)和研究變得非常困難,。為了解決這個問題，科學(xué)家們開發(fā)了許多不同的肝細胞培養(yǎng)方法,，其中包括貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng),。隨著3D培養(yǎng)技術(shù)的出現(xiàn)，原代肝細胞的應(yīng)用范圍也進一步得到了擴展,。3D培養(yǎng)是一種將細胞培養(yǎng)在三維空間中的方法,，可以更好地模擬體內(nèi)的情況。在3D培養(yǎng)中,，肝細胞可以形成復(fù)雜的結(jié)構(gòu),，從而更好地模擬體內(nèi)的情況,。此外，3D培養(yǎng)還可以使原代肝細胞更好地保持其原有的形態(tài)和功能,，從而更好地研究肝細胞的生理和病理過程,。原代肝細胞的培養(yǎng)和研究對于了解肝臟的生理和病理過程至關(guān)重要。不同的原代肝細胞培養(yǎng)方法各有優(yōu)缺點,，科學(xué)家們需要根據(jù)具體的研究目的選擇合適的方法,。隨著3D培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展，相信原代肝細胞的研究將會更加深入,。代肝細胞的研究將會更加深入，為藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究提供更加準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和依據(jù),。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)輔助試劑,，包括細胞復(fù)蘇、鋪板,、維持培養(yǎng)基和培養(yǎng)酶等,。
原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中，根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,，可分為懸浮型和貼壁型兩大類,。原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團，胞體為圓形,。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長,，生存空間大，允許長時間生長,，便于大量繁殖,。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性，細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,，因此細胞不會相互重疊于其上面生長,。細胞生長、匯合成片后,，雖發(fā)生接觸抑制,，但只要營養(yǎng)充分，仍可增殖分裂,，但當(dāng)細胞數(shù)量達到一定密度后,，由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響，細胞分裂停止,，稱為密度抑制,。當(dāng)肝細胞被分離后，可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng),。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內(nèi)細胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致,，隨時間的延長而迅速下降，故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究,。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復(fù)過來,，保持了正常肝細胞的生物學(xué)特征及代謝活性，一般用于酶誘導(dǎo)研究,、藥物細胞毒性研究,、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。目前,，分離原代肝細胞的方法有直接剪切法,、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。深圳原代肝細胞分離
原代肝細胞作為體外藥物代謝研究的“金標(biāo)準(zhǔn)”,，在藥物研發(fā)和毒理學(xué)研究中具有重要的意義,。廣東新西蘭兔原代肝細胞種類
在進行原代肝細胞培養(yǎng)時，通常需要對分離得到的肝細胞進行特殊的處理或篩選,，以提高肝細胞的存活率和純度,。以下是一些常見的處理或篩選方法：1.密度梯度離心：密度梯度離心是一種常用的分離和篩選肝細胞的方法。通過使用密度梯度介質(zhì)（如Percoll或Ficoll）,，可以將肝細胞與其他細胞分離出來,，從而提高肝細胞的純度。2.選擇性貼壁：選擇性貼壁是一種基于肝細胞和其他細胞在培養(yǎng)皿上的貼壁特性不同的篩選方法,。肝細胞通常會在培養(yǎng)皿上貼壁生長,，而其他細胞則不會。通過選擇合適的培養(yǎng)條件和時間,，可以篩選出貼壁生長的肝細胞,。3.流式細胞術(shù)：流式細胞術(shù)是一種基于細胞表面標(biāo)志物的篩選方法。通過使用熒光標(biāo)記的抗體,，可以識別和篩選出表達特定標(biāo)志物的肝細胞,。4.細胞篩選：細胞篩選是一種基于細胞形態(tài)和功能的篩選方法。通過觀察細胞的形態(tài)和功能特征,，可以篩選出符合要求的肝細胞,。以上是一些常見的原代肝細胞處理或篩選方法，不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的,。在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,，需要根據(jù)具體情況選擇合適的處理或篩選方法，以提高肝細胞的存活率和純度,。廣東新西蘭兔原代肝細胞種類