外泌體作為藥物載體由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式,,外泌體作為藥物運(yùn)輸?shù)妮d體具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。例如外泌體的尺寸分布能夠增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng),,從而有選擇性地深入組織;其外層磷脂雙分子層可以保護(hù)內(nèi)容物不受各種生物酶的影響,,維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,其體積小,,結(jié)構(gòu),、組成與細(xì)胞膜類似,導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時(shí)深入組織內(nèi)部,,有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時(shí),,能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,某些細(xì)胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,,可以與特定的或組織結(jié)合。因此,,載藥成為外泌體研究的一個(gè)重要分支,,具有良好的應(yīng)用前景。在外泌體中引入藥物的方式包括體內(nèi)裝載和體外裝載兩種,。體內(nèi)藥物裝載可以通過傳統(tǒng)方法(如病毒轉(zhuǎn)染,、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或電穿孔等)轉(zhuǎn)染來源細(xì)胞,編碼感興趣的RNA或蛋白質(zhì),,也可以使藥物與來源細(xì)胞共混,,使細(xì)胞分泌產(chǎn)生含有目標(biāo)生物分子的外泌體。體外藥物裝載則首先需要得到純化的外泌體,,然后將感興趣的藥物通過電穿孔或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染等方法裝入純化的外泌體,。外泌體內(nèi)可裝載的藥物包括小分子化學(xué)藥物、蛋白質(zhì)和多肽,、核酸藥物,、天然產(chǎn)物等。通過不同分組之間的細(xì)胞對(duì)于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同,,可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力的差別,。云南大鼠科研技術(shù)服務(wù)分離
啟醫(yī)療,個(gè)體化用藥貝克曼庫(kù)爾特細(xì)胞專題--助力病毒載體純化,、細(xì)胞特性分析產(chǎn)品庫(kù)儀器設(shè)備耗材試劑抗體技術(shù)服務(wù)生物芯片芯片掃描儀|芯片點(diǎn)樣儀|生物芯片系統(tǒng)|生物芯片|其它測(cè)讀系統(tǒng)洗板機(jī)|多功能篩選系統(tǒng)|大型分析系統(tǒng)|化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀|分光光度計(jì)|其它|光譜系統(tǒng)原子吸收光譜儀|可見光光譜儀|熒光光譜儀|紅外光譜儀|近紅外光譜儀|LIBS光譜儀|拉曼光譜儀|紫外/可見/近紅外光譜儀|其它分子生物實(shí)驗(yàn)儀器電泳設(shè)備|紫外設(shè)備|普通PCR儀|定量PCR儀|數(shù)字PCR儀|DNA/有機(jī)/多肽合成|轉(zhuǎn)基因儀|其它顯微系統(tǒng)倒置顯微鏡|實(shí)體顯微鏡|生物顯微鏡|電子顯微鏡其它顯微鏡|顯微操縱|附件和濾光片|其它色譜系統(tǒng)液相色譜系統(tǒng)|制備液相色譜系統(tǒng)|毛細(xì)管LC系統(tǒng)氣相色譜系統(tǒng)|離子色譜系統(tǒng)|色譜系統(tǒng)檢測(cè)器樣品管理工具|色譜系統(tǒng)附件質(zhì)譜系統(tǒng)飛行質(zhì)譜|四極桿質(zhì)譜|離子阱質(zhì)譜|等離子質(zhì)譜|毛細(xì)管電泳/質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)|雜交質(zhì)譜|質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)品|其它實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化氨基酸分析系統(tǒng)|蛋白純化系統(tǒng)|蛋白質(zhì)翻譯系統(tǒng)|全自動(dòng)分液系統(tǒng)|核酸提取純化全自動(dòng)血液采樣系統(tǒng)|基因組/蛋白組設(shè)備DNA測(cè)序儀|全基因組測(cè)序儀|基因分型系統(tǒng)|雙向電泳系統(tǒng)|蛋白質(zhì)純化|蛋白質(zhì)斑點(diǎn)切取系統(tǒng)|其它神經(jīng)生物學(xué)儀器動(dòng)物功能檢測(cè)設(shè)備|動(dòng)物處理設(shè)備|,。海南科研技術(shù)服務(wù)構(gòu)建動(dòng)物造模 | 膿毒癥造模方法之CLP造模法。
|基因組DNA擴(kuò)增|RNA擴(kuò)增|克隆與表達(dá)克隆基因|克隆試劑盒|克隆篩選|感受態(tài)細(xì)胞|突變轉(zhuǎn)染|轉(zhuǎn)化|體外轉(zhuǎn)錄/翻譯|其它表達(dá)分析Northern印跡分析|分支DNA和mRNA定量|差別基因表達(dá)|反義寡核苷酸|RACE試劑盒|SAGE試劑盒|其它抗體蛋白A,GPLUS|抑制/凋亡抗體|信號(hào)分子抗體結(jié)構(gòu)蛋白抗體|磷酸化特異抗體|融合蛋白tag抗體非哺乳動(dòng)物蛋白抗體|細(xì)胞周期蛋白抗體|轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體|抗體制備佐劑|抗體片段|抗體同種型|抗體純化|抗體制備試劑盒|其它第二抗體westernblot二抗|免疫組化二抗|其它試劑盒ELISA試劑盒|免疫組化試劑盒|放射免疫試劑盒|westernblot試劑盒|流式細(xì)胞試劑盒|其它抗體相關(guān)siRNA|重組蛋白|白蛋白|試劑|其它分子生物學(xué)服務(wù)DNA提取/純化|DNA測(cè)序|第二代高通量測(cè)序|DNA保存和活化|基因合成|基因步行|基因組分析生物信息學(xué)|SNP檢測(cè)|實(shí)時(shí)定量PCR服務(wù)|文庫(kù)/載體構(gòu)建|寡核苷酸合成Oligo合成|實(shí)時(shí)PCROligo合成|其它細(xì)胞生物學(xué)服務(wù)細(xì)胞培養(yǎng)|流式細(xì)胞檢測(cè)|細(xì)胞毒性測(cè)試|細(xì)胞因子生物檢測(cè)|影像服務(wù)|篩選/發(fā)育服務(wù)|其它干細(xì)胞技術(shù)服務(wù)干細(xì)胞提取|干細(xì)胞鑒定|干細(xì)胞誘導(dǎo)分化|干細(xì)胞常規(guī)檢測(cè)|干細(xì)胞擴(kuò)增|干細(xì)胞轉(zhuǎn)基因|干細(xì)胞其他相關(guān)實(shí)驗(yàn)|微生物學(xué)服務(wù)微生物鑒定|抑菌作用測(cè)試|內(nèi)測(cè)試|內(nèi),。
用伊紅乙醇液對(duì)比染色1~3min,。(4)將切片放入95%乙醇中洗去多余的紅色,然后放入無水乙醇中3~5min,吸干后將切片放入二甲苯Ⅰ,、Ⅱ中各3~5min,。3、觀察在鏡下可見卵巢呈扁橢圓形,,表面為單層扁平上皮細(xì)胞或單層立方上皮,,卵巢實(shí)質(zhì)分為皮質(zhì)和髓質(zhì)??梢娚掀?,原始卵泡和生長(zhǎng)卵泡。卵巢組織中各發(fā)育階段卵泡及卵巢基質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰可見,細(xì)胞核呈藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)及間質(zhì)成分呈淺紅色,卵泡中卵母細(xì)胞,、卵泡細(xì)胞,、透明帶均清晰可見。注意事項(xiàng)1.取材注意事項(xiàng)(1)取材動(dòng)作要迅速,,不宜作太久的拖延以免組織細(xì)胞的成分,、結(jié)構(gòu)等發(fā)生變化。(2)切片材料應(yīng)根據(jù)需要觀察的部位進(jìn)行選擇,,盡可能不要損傷所需要的部分,。(3)切取的組織塊不宜太大,以利于固定劑穿透,,通常以5mmx5mmx2mm或10mmx10mmx2mm為宜,。2.固定注意事項(xiàng)(1)一般固定液,都以新配為好,,配好后應(yīng)貯存在陰涼處,,不宜放在日光下,以免引起化學(xué)變化,,失去固定作用,。(2)有些混合固定液的成份之間會(huì)發(fā)生氧化還原作用,一定要在使用前才混合,,如果混合太早,,固定時(shí)就沒有作用了。(3)固定材料時(shí),,固定液必須充足,,一般為材料塊的20~30倍,有些水分多的材料,,中間應(yīng)更換1~2次新液,。(4)材料固定完畢后。實(shí)驗(yàn)干貨 | 常用分子生物學(xué)技術(shù)原理.
2)固定的目的①保持其原有狀態(tài):使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì),、脂肪,、糖,、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),迅速防止,、細(xì)胞的死后變化,,防止自溶與,防止細(xì)胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu),,使之盡量保持生前的狀態(tài)和結(jié)構(gòu),。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同成分對(duì)染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察,。③使塊硬化,,便于制作薄片(塊在脫水、包埋,、切片,、染色等過程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,,即只有一種試劑,;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成,。作為較好的固定液,,應(yīng)有下列特性,首先,,有強(qiáng)滲透力,能迅速的滲入內(nèi)部,;其次,,不使過度收縮或膨脹,并能使內(nèi)欲觀察的成分得以凝固為不溶性物質(zhì),;能使達(dá)到一定的硬度并獲得較佳的折光率和對(duì)某些染料具有較強(qiáng)的親和力,。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的,,常需要特殊的固定液,,取樣之前應(yīng)做好準(zhǔn)備。如眼球樣本應(yīng)使用FAS眼球固定液,,脂肪應(yīng)使用脂肪固定液等,。此外,在進(jìn)行骨樣本制備的時(shí)候,,還應(yīng)注意提前進(jìn)行脫鈣處理,,可根據(jù)具體情況選擇慢脫鈣或快脫鈣處理??偟膩碚f,,樣品的采集是實(shí)驗(yàn)中至關(guān)重要的一環(huán),,如果取樣環(huán)節(jié)出現(xiàn)了偏差,往往會(huì)導(dǎo)致后續(xù)檢測(cè)結(jié)果的偏移,。純干貨Western blot (WB)條帶灰度統(tǒng)計(jì)與GraphPad作圖.寧夏乳鼠科研技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)
建立疾病模型的目的是為了防治人類疾病,。云南大鼠科研技術(shù)服務(wù)分離
二甲苯Ⅰ、Ⅱ各15min至透明,。(2)放入二甲苯和石蠟等量混合液處理15min,,再放入石蠟Ⅰ、Ⅱ透蠟各50~60min,。透蠟在恒溫箱內(nèi)進(jìn)行,,箱內(nèi)溫度保持在55~60℃左右。4,、包埋(1)用鑷子夾取蠟?zāi)T诰凭珶羯仙约訜?,并倒入少許從溫箱中取出的純石蠟。(2)再將鑷子在酒精燈上稍加熱,,夾取材料將切面朝下放入蠟?zāi)V?,排列整齊,再放上包埋盒,,輕輕倒入熔蠟,。5、切片,、展片,、貼片(1)將包埋好的石蠟塊固定在切片機(jī)上,調(diào)整厚度調(diào)節(jié)器到所需的切片厚度,,一般為4~6μm,。(2)切下的組織薄片要放到加熱的水中燙平,再貼到載玻片上,,放45℃恒溫箱中烘干,。二、HE染色1,、脫蠟,、復(fù)水(1)保持水浴鍋溫度為60℃,將切片放入干燥的染色缸內(nèi),,放入水浴鍋中,,30min至蠟熔化。(2)石蠟切片經(jīng)二甲苯Ⅰ,、Ⅱ脫蠟各5min,,然后放入100%、95%,、90%,、80%,、70%各級(jí)酒精溶液中各3~5min,再放入蒸餾水中3min,,以便染料可以進(jìn)入組織,。2、染色,、脫水(1)切片放入蘇木精中染色約10~30min,,用流水沖洗約15min,使切片顏色變藍(lán),。(2)將切片放入1%鹽酸乙醇液中褪色,,幾秒后見切片變紅、顏色較淺即可,,后將切片再放入流水中使其恢復(fù)藍(lán)色,。(3)切片放入50%、70%,、80%乙醇中各3~5min,。云南大鼠科研技術(shù)服務(wù)分離