巧亦捷(ingeNova)是翊新診斷技術(shù)(蘇州)有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產(chǎn)品品牌,,以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創(chuàng)生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產(chǎn)品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測,、貓消化道疫病檢測,、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測,,非洲豬瘟,、藍(lán)耳等豬病核酸檢測,牛逼支,、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測,,人畜共患病核酸檢測,以及魚蝦等水生動物的核酸檢測,。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機(jī)是巧亦捷系列產(chǎn)品的主打檢測平臺,,巧亦捷基于此平臺技術(shù)致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案,。在寵物醫(yī)療中,,目前病毒檢測主要包括膠體金檢測(試紙)和PCR檢測。動物源PCR熒光探針法
開展動物疫病檢測,,有利于及時(shí)明確動物病因及根源所在,,降低疫病發(fā)生率,提高診療效果,,促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展,。可以對動物疫病起到預(yù)防作用,,真正準(zhǔn)確分析當(dāng)前動物疫病的流行特征及其可能對周邊造成的危害,。提高動物產(chǎn)品質(zhì)量,使人們的食品安全得到盡可能的保障?,F(xiàn)階段主流的動物疫病檢測方法主要有傳統(tǒng)檢測,、血清學(xué)檢測和核酸檢測。核酸檢測作為動物疫病檢測中常用的方法之一,,具有實(shí)驗(yàn)周期短,、靈敏度高、特異性強(qiáng),、實(shí)時(shí)定量等優(yōu)勢,。江蘇動物疾病PCR動物檢疫巧亦捷的品牌主張為:用心關(guān)愛每一個(gè)生命健康。
樣本處理,、核酸提取,、PCR擴(kuò)增和數(shù)據(jù)處理是PCR的四個(gè)步驟,。其中核酸提取可以幫助研究人員準(zhǔn)確地快速地分離細(xì)胞或分子材料中的有效核酸,并獲得足夠的樣本為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供依據(jù),。無論是病毒,、細(xì)菌還是體細(xì)胞,遺傳物質(zhì)都不是裸露在細(xì)胞外,,都是在細(xì)胞內(nèi),。需要有一個(gè)核酸提取試劑將遺傳物質(zhì)釋放到外界,保證PCR反應(yīng)效率,。將核酸釋放出來后,,提取與純化過程中同樣需要將樣本中的一些PCR抑制物去除掉,獲得純度比較高的核酸,,比較大限度的保證PCR反應(yīng)中抑制物的濃度降低,,提高核酸檢測的準(zhǔn)確性。因此核酸提取與純化這一步,,也是保證PCR反應(yīng)結(jié)果的關(guān)鍵一步,。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)采用磁珠法提取,效率高且可確保結(jié)果更準(zhǔn)確,。
PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復(fù)制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術(shù),,即所謂的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),這種技術(shù)可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)大量復(fù)制特定的基因片段,。由于其高敏感性和高特異性的特點(diǎn),,PCR技術(shù)被應(yīng)用在寵物疾病分子的診斷上,將從疑似患病寵物(血液,、眼鼻分泌物,、糞便,尿液或腹水)中采樣的極微量病原(細(xì)菌,、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本,,透過PCR的方式大量被復(fù)制,再以核酸電泳的方式判讀結(jié)果,,從而獲得早期,、快速、穩(wěn)定和準(zhǔn)確的診斷結(jié)果.PCR檢測正越來越多的被動物臨床醫(yī)師所接受,,并廣泛應(yīng)用于動物臨床疾病診斷。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(熱穩(wěn)定DNA聚合酶)的作用下,,由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng),,三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi),,以一對人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物,,第一步,,模板DNA變性,以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物,,目的基因作為模板,,在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性,使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈,。第二步,,模板DNA與引物退火(復(fù)性),模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃,,引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對,。第三步,引物的延伸,,DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下,,70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán),,2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán),,2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段,、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍,,從而實(shí)現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制,,因此PCR反應(yīng)具有高度特異性,。寵物傳染病檢測技術(shù)方面,核酸檢測方法具有極高的靈敏度和特異性,,可很大程度縮短傳染病檢測的窗口期,。動物源PCR熒光探針法
傳統(tǒng)的免疫學(xué)檢測(如:熒光和膠體金)存在靈敏性和特異性的局限性。動物源PCR熒光探針法
巧亦捷核酸檢測一體機(jī)的特異性及靈敏度可達(dá)99%以上,,使用的PCR熒光探針技術(shù)不但可以檢測出病毒的種類,,更可以檢測出樣品里100個(gè)/ul數(shù)量級的病毒數(shù)量,可謂特異性極強(qiáng),,準(zhǔn)確度極高,!若檢測出有病毒,但沒有發(fā)病也要引起重視,,因?yàn)闄z測的病毒是一些對動物機(jī)體傷害極大的病毒,,或者是人畜共患病,雖然現(xiàn)在沒有發(fā)病,,并不表明以后不會發(fā)病,,如果任其在體內(nèi)發(fā)展,等到病毒繁殖到一定的數(shù)量后,,或者機(jī)體的抵抗力突然下降,,也許就會發(fā)生災(zāi)難性的爆發(fā),,對動物造成極大的傷害。動物源PCR熒光探針法